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實(shí)驗(yàn)技巧

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小鼠、大鼠采血法

1.割(剪)尾采血

  當(dāng)所需血量很少時(shí)采用本法。固定動(dòng)物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的溫水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈。再將尾擦干,用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取,采血結(jié)束,傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口,割破尾動(dòng)脈或靜脈,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。

2.鼠尾刺血法

  大鼠用血量不多時(shí)(僅做白細(xì)胞計(jì)數(shù)或血紅蛋白檢查),可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7號(hào)或8號(hào)注射針頭,刺入鼠尾靜脈,拔出針頭時(shí)即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果長(zhǎng)期反復(fù)取血,應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐漸向近心端穿刺。

3.眼眶靜脈叢采血 

采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部(大鼠采血需帶上紗手套),應(yīng)防止動(dòng)物窒息。當(dāng)取血時(shí)左手拇指及食指輕輕壓迫動(dòng)物的頸部?jī)蓚?cè),使眶后靜脈叢充血。右手持續(xù)接7號(hào)針頭的1ml注射器或長(zhǎng)頸(3~4cm)硬質(zhì)玻璃滴管(毛細(xì)管內(nèi)徑0.5-1.0mm),使采血器與鼠面成45℃的夾角,由眼內(nèi)角刺入,針頭斜面先向眼球,刺入后再轉(zhuǎn)180度使斜面對(duì)著眼眶后界。刺入濃度,小鼠約2~3mm,大鼠約4~5mm。當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止推進(jìn),同時(shí),將針退出約0.1-0.5mm,邊退邊抽。若穿刺適當(dāng)血液能自然流入毛細(xì)管中,當(dāng)?shù)玫剿璧难亢?,即除去加于頸部的壓力,同時(shí),將采血器拔出,以防止術(shù)后穿刺孔出血。

  若技術(shù)熟練,用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血均無多大困難。左右兩眼輪換更好。體重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;體重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可適用于某些生物化學(xué)項(xiàng)目的檢驗(yàn)。

4.斷頭取血

  采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大(?。┦蟮念i部皮膚,并作動(dòng)物頭朝下傾的姿勢(shì)。右手用剪刀猛剪鼠頸,約1/2-4/5的頸部前剪斷,讓血自由滴入盛器。小鼠可采用約0.8~1.2ml;大鼠約5-10ml。

5.心臟采血

  鼠類的心臟較小,且心率較快,心臟采血比較困難,故少用?;铙w采血方法與豚鼠相同。若做開胸一次死亡采血,先將動(dòng)物作深麻醉,打開胸腔,暴露心臟,用針頭刺入右心室,吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml;大鼠約0.8-1.2ml。

6.頸動(dòng)靜脈采血

  先將動(dòng)物仰位固定,切開頸部皮膚,分離皮下結(jié)締組織,使頸靜脈充分暴露,可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動(dòng)脈,離心端結(jié)扎,向心端剪口將血滴入試管內(nèi)。

7.腹主動(dòng)脈采血

  最好先將動(dòng)物麻醉,仰臥固定在手術(shù)架上,從腹正中線皮膚切開腹腔,使腹主動(dòng)脈清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血?;蛴脽o齒鑷子剝離結(jié)締組織,夾住動(dòng)脈近心端,用尖頭手術(shù)剪刀,剪斷動(dòng)脈,使血液噴入盛器。

8.股動(dòng)(靜)脈采血

  先由助手握住動(dòng)物,采血者左手拉直動(dòng)物下肢,使靜脈充盈?;蛘咭圆珓?dòng)為指標(biāo),右手用注射器刺入血管。體重15-20g 小鼠采血約0.2-0.8ml,大鼠約0.4-0.6ml。