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流式表面/胞內(nèi)抗原檢測

流式表面/胞內(nèi)抗原檢測

概念:

流式細(xì)胞術(shù)是一種基于熒光的檢測,能同時(shí)測定懸浮的單個(gè)細(xì)胞多種特性,包括細(xì)胞計(jì)數(shù)和蛋白表達(dá)情況。對細(xì)胞不同特性實(shí)現(xiàn)快速、定量和準(zhǔn)確測定,分析細(xì)胞群異質(zhì)性。

使用具有不同激發(fā)和發(fā)射特性的熒光分子,可以在單個(gè)細(xì)胞中獲得多個(gè)讀數(shù)。這些熒光分子可以附接到靶向特定蛋白或蛋白修飾的抗體上,或者作為染料直接結(jié)合細(xì)胞組分。

原理與方法:

流式表面抗原檢測通常使用活細(xì)胞,而胞內(nèi)抗原檢測需要固定細(xì)胞后進(jìn)行破膜處理。

若有需要,可同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞表面染色和胞內(nèi)蛋白染色。由于細(xì)胞固定后抗體不一定識別表面抗原表型,需要提前確認(rèn)抗體性能。


                                                      流式檢測細(xì)胞表面抗原