健康的動(dòng)脈具有彈性，但隨著時(shí)間的推移，動(dòng)脈壁會(huì)變硬，這種情況通常稱(chēng)為動(dòng)脈硬化。受累動(dòng)脈的病變內(nèi)膜局部會(huì)有脂質(zhì)積聚、纖維組織增生和鈣質(zhì)沉著，形成斑塊。由于在動(dòng)脈內(nèi)膜積聚的脂質(zhì)外觀呈黃色粥樣，因此稱(chēng)為動(dòng)脈粥樣硬化。

動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型構(gòu)建的方法

一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)脈硬化容易實(shí)現(xiàn)，而是否有斑塊、斑塊是什么樣子，斑塊的成分如何，斑塊發(fā)生的部位在哪里，這些往往與人類(lèi)的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊有很大的差別，因此，應(yīng)當(dāng)特別注意動(dòng)物的選擇。

目前可以作為動(dòng)脈粥樣硬化（AS）模型的動(dòng)物有：兔、豬、鼠、雞、鴿、猴和犬等。其中兔和鼠是其中最常用的，兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)：

兔對(duì)高脂飲食特別敏感易造模，是最早用于研究動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。然而其AS病變與人的病變只在表面上相似，病變中的脂類(lèi)和巨噬細(xì)胞含量遠(yuǎn)比人類(lèi)大；

鼠具有抗AS性，但作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，具有經(jīng)濟(jì)效益高、生存能力強(qiáng)、死亡率低的特點(diǎn)，鼠AS模型病變的形態(tài)、斑塊的破裂位置與人類(lèi)十分相似，但鼠模型的斑塊破裂處缺乏纖維蛋白和血栓形成。

1）高脂、高膽固醇飼料誘導(dǎo)法

高脂飼喂法早在20世紀(jì)70年代已被采用，至今仍是模擬AS模型最重要的方法。特點(diǎn)是死亡率低，可長(zhǎng)期觀察，但費(fèi)時(shí)久。

造模機(jī)制：動(dòng)物機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂，血脂升高，容易引起血管內(nèi)皮損傷，導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能紊亂、通透性增高，最終導(dǎo)致血管壁的脂質(zhì)浸潤(rùn)、形成動(dòng)脈粥樣硬化。

造模方法：在動(dòng)物飼料中加入過(guò)量的膽固醇和脂肪。（在基礎(chǔ)飼料前提下，添加膽固醇、蛋黃、豬油。根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，采用不同配方。?/p>

由于嚙齒類(lèi)動(dòng)物(如小鼠、大鼠）對(duì)膽固醇幾乎不反應(yīng)，為了促進(jìn)病變的形成，在高脂、高膽固醇飼料中可加入膽酸鹽、甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、維生素D、煙堿或蔗糖等，可進(jìn)一步加速動(dòng)脈病變的形成。

舉例：

①兔：選用4月齡左右雄性日本大耳白家兔或新西蘭家兔，給予含0.3%膽固醇飲食（建議飲食中膽固醇水平小于0.6%)，可使家兔血漿膽固醇迅速升高，6周后家兔主動(dòng)脈弓可出現(xiàn)明顯動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。隨著飼喂時(shí)間延長(zhǎng)，可誘導(dǎo)家兔胸主動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈出現(xiàn)粥樣硬化斑塊。

②大鼠：含膽酸和硫脲嘧啶的高脂、高膽固醇飲食誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化。此外，給大鼠飼喂高膽固醇飲食，同時(shí)給予大量維生素D2能使血漿膽固醇水平升高，主動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈出現(xiàn)粥樣斑塊。

③小鼠：選用6~8周C57BL/6小鼠，用含膽固醇1.25%、膽酸0.5%和脂肪15%的飲食飼喂10周，能誘導(dǎo)出動(dòng)脈粥樣硬化早期病變。

優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，成本較低，較符合人類(lèi)飲食的特點(diǎn)，病理改變與人早期相似。缺點(diǎn)：造模時(shí)間較長(zhǎng)，不易形成類(lèi)似人體的后期粥樣斑塊病變，期間易導(dǎo)致繼發(fā)感染從而影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。

適用于：早期動(dòng)脈粥樣硬化的研究。

2） 免疫損傷法

AS的發(fā)病機(jī)制有免疫因素的存在，所以可以從免疫學(xué)的角度來(lái)建立AS模型，如使用牛血清白蛋白、卵清白蛋白、肺炎衣原體、EB病毒、巨細(xì)胞病毒、幽門(mén)螺桿菌、內(nèi)毒素等進(jìn)行免疫刺激，從而誘發(fā)AS的產(chǎn)生。

造模機(jī)制：免疫刺激引起動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成及sCD40L水平升高，從而引起動(dòng)脈粥樣硬化。

造模方法：（1）將大鼠主動(dòng)脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇、β-脂蛋白及甘油三脂升高。

（2）給兔注射馬血清10ml/kg/次，共4次，每次間隔17天，動(dòng)脈內(nèi)膜損傷率為88%，冠狀動(dòng)脈亦有粥樣硬化的病變；同時(shí)給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。

（3）兔喂飼含1%膽固醇的飲料，靜脈注射牛血清白蛋白250mg/kg，可加速高膽固醇飼料引起的動(dòng)脈內(nèi)膜病變形成。

優(yōu)點(diǎn)：建模時(shí)間短、成活率高、模型穩(wěn)定、可控性好。
缺點(diǎn)：所形成的單純免疫性炎性不能涵蓋動(dòng)脈粥樣硬化炎性反應(yīng)過(guò)程，其病理特征也有待進(jìn)一步觀察。

適用于：動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制的研究

3）血管內(nèi)皮損傷法

造模機(jī)制：通過(guò)外力損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，使血管內(nèi)皮通透性、黏附性、血液凝固改變，造成動(dòng)脈內(nèi)膜損傷或功能障礙，再輔助性飼喂高脂、高膽固醇飲食，可誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化形成。

根據(jù)不同的外力，血管內(nèi)皮損傷法可以分為機(jī)械損傷法和物理生化因子損傷法。前者主要是用球囊導(dǎo)管、鋼絲套圈或金屬絲等來(lái)?yè)p傷血管內(nèi)皮，而后者則是用化學(xué)藥品、電刺激、空氣干燥或放射線等來(lái)?yè)p傷血管內(nèi)皮。

其中球囊損傷法具有可靠性強(qiáng)、可重復(fù)性高、更符合臨床動(dòng)脈粥樣硬化疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程等優(yōu)點(diǎn)。

A 球囊損傷法

方法：將球囊導(dǎo)管插入血管后，將球囊充氣，反復(fù)進(jìn)出牽拉3次，以損傷血管內(nèi)膜。

大鼠：將充滿生理鹽水的塑料球囊導(dǎo)管自頸外動(dòng)脈進(jìn)入胸主動(dòng)脈，向外拉至頸外動(dòng)脈再進(jìn)入胸主動(dòng)脈，反復(fù)3次，再喂以高脂、高膽固醇飲食8周后，可以出現(xiàn)明顯動(dòng)脈粥樣硬化病變。

注意：球囊損傷管到達(dá)頸總動(dòng)脈中段后，進(jìn)行反復(fù)牽拉時(shí)，用力一定要輕，以防動(dòng)物意外死亡。

優(yōu)點(diǎn)：時(shí)間短，定位明確，易于評(píng)價(jià)，并可根據(jù)不同的研究目的和動(dòng)物，選用不同的動(dòng)脈造模。
缺點(diǎn)：形成的斑塊較易脫落而形成血栓，若球囊大小控制不佳會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈破裂或建模失敗。

適用于：動(dòng)脈粥樣硬化的用藥或轉(zhuǎn)基因治療實(shí)驗(yàn)的研究
B 氣體干燥法

方法：空氣干燥法是以流量為50-250ml/min的干燥清潔氣流吹實(shí)驗(yàn)部位的動(dòng)脈血管內(nèi)膜5-15min，以造成內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞變性和功能減退，建立動(dòng)脈粥樣硬化模型。

優(yōu)點(diǎn)：成模時(shí)間短，操作柔和，內(nèi)膜變化更接近自然狀態(tài)下動(dòng)脈粥樣硬化形成的進(jìn)程，可控性強(qiáng)，不易損害到血管的其他部位。

缺點(diǎn)：氣流吹的部位要相對(duì)恒定，不宜過(guò)長(zhǎng)，時(shí)間也要充足，若內(nèi)皮損傷輕則不能形成動(dòng)脈粥樣硬化。

適用于：動(dòng)脈粥樣硬化內(nèi)皮細(xì)胞作用的研究

4）動(dòng)脈結(jié)扎法

方法：對(duì)血管結(jié)扎縫合使血管內(nèi)血流速度和切應(yīng)力發(fā)生改變，建立動(dòng)脈粥樣硬化模型。

優(yōu)點(diǎn)：對(duì)內(nèi)膜損害小且能保留血管彈性變形的能力。

缺點(diǎn)：需精良的設(shè)備，手術(shù)操作技術(shù)難度大、要求高

5）基因改造法

由于鼠具有抗AS性，各種基因敲除和轉(zhuǎn)基因小鼠是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)之一。脂蛋白 E（ApoE）或低密度脂蛋白受體（LDL-R）基因敲除鼠可自發(fā)形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，是動(dòng)脈粥樣硬化研究的常用模型。

優(yōu)點(diǎn)：能自發(fā)產(chǎn)生動(dòng)脈粥樣硬化。

缺點(diǎn)：基因改造小鼠體積小，臨床性檢查評(píng)估很難，與人類(lèi)脂類(lèi)代謝差異較大，存在一定的局限性。

適用于：動(dòng)脈粥樣硬化炎癥和免疫因子的作用機(jī)制研究

6）聯(lián)合法

高脂喂養(yǎng)造成的動(dòng)物高脂血癥是引起動(dòng)脈粥樣硬化的基礎(chǔ)。而各種方法導(dǎo)致內(nèi)膜損傷，加快了動(dòng)脈粥樣硬化的形成，從而節(jié)省造模所需要點(diǎn)時(shí)間。

如：靜脈注射脂多糖聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)法：通過(guò)兔耳緣靜脈注射不同劑量(100、200、1000、2000 ng/ kg)的高純級(jí)脂多糖引起發(fā)熱性炎癥反應(yīng),同時(shí)聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)建立兔 AS 模型。

腹腔注射維生素D3聯(lián)合高脂飼料聯(lián)合喂養(yǎng)法：對(duì)Wistar大鼠飼以高脂飼料基礎(chǔ)上給予腹腔注射維生素D3，4周后，其血清Ca2+、三酰甘油及低密度脂蛋白C明顯升高，動(dòng)脈內(nèi)膜下可見(jiàn)明顯的鈣化，出現(xiàn)典型動(dòng)脈粥樣硬化病理變化。

模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)

(1) 血清生化指標(biāo)檢測(cè)：如總膽固醇（TC）含量、甘油三酯（TG）含量、高密度脂蛋白（HDL）含量、低密度脂蛋白（LDL）含量、丙二醛（MDA）含量和氧化高密度脂蛋白(OX-HDL)含量等。

(2) 病理形態(tài)學(xué)指標(biāo)

病理學(xué)檢測(cè)是“金指標(biāo)”，是評(píng)價(jià)As病變重要的特異性指標(biāo)

①肉眼大體觀察動(dòng)脈管壁進(jìn)行病變硬化分級(jí)：

0級(jí)：內(nèi)膜比較光滑，無(wú)奶油樣變化；

0.5級(jí)：內(nèi)膜有廣泛奶油樣變化，但無(wú)凸出于表面的斑塊；

1級(jí)：有明顯的凸起奶油樣斑塊，面積小于3mm2；

2級(jí)：斑塊面積大于3mm2；

3級(jí)：斑塊融合成片，大部分斑塊面積大于3mm2；

4級(jí)：斑塊幾乎覆蓋整個(gè)動(dòng)脈內(nèi)膜。

②主動(dòng)脈弓油紅O染色

③主動(dòng)脈HE染色

④電鏡觀察