1、將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。

2、用 10 秒鐘時(shí)間將小管的蓋子擰松 1/4 以去除殘留在螺紋處的液氮，然后將蓋子蓋緊。

3、將小管放入 37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體完全融化。

4、將小管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。

5、用 70%的酒精沖洗小管，然后擦去多余酒精。

6、打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋。用 1ml 離心管離心內(nèi)容物。

7、平衡管內(nèi)物，用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細(xì)胞用 T-75 的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細(xì)胞類型推

薦接種密度為每平方厘米 5000 細(xì)胞。

8、蓋好蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。

9、將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)

10、植入培養(yǎng)后第 6-16 小時(shí)更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。