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4D-label free定量蛋白質(zhì)組學(xué)

實驗介紹

4D-label free蛋白質(zhì)組學(xué)是基于timsTOF Pro離子淌度平臺的新一代非標記蛋白組學(xué)技術(shù),通過數(shù)據(jù)依賴性采集-同步累積連續(xù)碎裂(ddaPASEF)掃描模式進行差異定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析。該技術(shù)是對傳統(tǒng)label free蛋白質(zhì)組學(xué)的升級,其核心是將數(shù)據(jù)依賴采集(DDA)與同步累積連續(xù)碎裂(PASEF)相結(jié)合,外加第四維度的離子淌度分離(基于肽段的碰撞截面積CCS),提高離子利用率和鑒定精準度,以更少上樣量、更快掃描速度,實現(xiàn)蛋白質(zhì)組學(xué)在覆蓋深度、靈敏度、通量方面的全面性提升。


實驗流程

圖片1.jpg

應(yīng)用方向

藥物應(yīng)答、基因敲除/過表達的蛋白表達譜分析

植物、微生物生長發(fā)育與脅迫逆境生理研究

疾病生物標志物與藥物作用靶點高通量分析

蛋白作用機制與特殊功能蛋白質(zhì)篩選

各種物種的蛋白質(zhì)組草圖構(gòu)建

臨床微量樣本檢測方式,如:外泌體、FFPE石蠟切片、活檢穿刺組織等


數(shù)據(jù)分析

標準數(shù)據(jù)分析內(nèi)容

蛋白質(zhì)總鑒定數(shù)量分析

蛋定與定量結(jié)果統(tǒng)計、差異結(jié)果統(tǒng)計、火山圖、聚類熱圖

差異蛋白質(zhì)功能分析

亞細胞定位、結(jié)構(gòu)域分析、GO功能分析、KEGG通路分析、PPT互作網(wǎng)絡(luò)分析

質(zhì)量控制分析

肽段離子質(zhì)量偏差分布、肽段離子得分分布、蛋白質(zhì)豐度比分布

高級數(shù)據(jù)分析內(nèi)容

WGCNA共表達分析

獲得與表型強關(guān)聯(lián)的核心蛋白質(zhì)

趨勢聚類分析

探討蛋白質(zhì)的表達趨勢模式


技術(shù)優(yōu)勢

? 4D技術(shù)加持,更加適合微量樣本

? 克服標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在樣本數(shù)量上的限制,靈活方便

? 采用布魯克的timsTOF Pro質(zhì)譜平臺,檢測速度提升近一倍