動物的選擇

試驗動物選擇有小鼠、大鼠、家兔、小型豬。

造模方法

一、小鼠

1、小鼠氯氣吸入法致肺水腫模型

取小白鼠一只，25g左右，稱體質量，計數(shù)呼吸頻率及觀察呼吸深度。將鼠放入廣口瓶中慢慢通入氯氣，待瓶中生成一層薄薄云霧狀氣體后中止通氣。觀察動物一般表現(xiàn)及呼吸變化。動物死后即解剖，切開胸腔觀察肺組織變化，然后用線結扎氣管下端，在結扎的上端剪斷氣管取出全肺，清除肺周圍的其他組織。將肺放在玻璃培養(yǎng)皿內，用紙吸去其外表水分，稱取肺的質量，計算肺占體重的百分數(shù)，與正常動物對照。

2、小鼠雙光氣吸入致肺水腫模型

將12 mg·L-1雙光氣滴在濾紙上，干后放入密閉容器內，將小鼠置于容器內15min，即可形成肺水腫，全部操作應在通風櫥進行數(shù)。

雙光氣主要作用于呼吸器官，認為是刺激呼吸道感受器，通過迷走神經將沖動傳入四疊體以下中樞，再通過交感神經將沖動傳至肺血管，使其通透性增高，而發(fā)生肺水腫。

二、大鼠

1、大鼠甲醛吸入法致肺水腫模型

大鼠按隨機數(shù)字表分對照組（10 只）和甲醛組（14 只）。稱量，標記，裝入大鼠籠中，置于染毒箱正中，啟動加氧泵并蓋好箱蓋，動物出現(xiàn)明顯癥狀時開始計時，讓大鼠在箱內連續(xù)吸入甲醛染毒素 2 h，密切觀察大鼠的一般反應情況并記錄，期間每隔25~30 min給箱內噴入霧化甲醛1次，每次約10 mL 。染毒結束后取出大鼠，放室外通風處，禁食不禁水，過5h后大鼠頸椎脫臼處死，稱體質量及心臟和肺臟濕質量，計算心肺系數(shù)、肺指數(shù)。

2、大鼠氯化銨中毒致肺水腫模型

稱重實驗組大鼠腹腔注射6%氯化銨，然后觀察一般情況和呼吸，存活時間。對照組不作任何處理，對動物實行安樂死。解剖，先結扎氣管以免液體外溢，將肺和心臟一起取出，剪除心臟和其它脂肪組織，用濾紙吸去肺表面的液體，用天平稱兩肺質量，計算肺質量系數(shù)，若肺質量系數(shù)>1%，證明肺水腫已形成。

3、大鼠腎上腺素靜脈輸注致肺水腫模型

有研究者建立了大鼠的實驗性肺水腫動物模型。大鼠稱質量后，用20%烏拉坦（5 mL·kg-1）腹腔注射麻醉或1%戊巴比妥鈉5 mL·kg-1肌肉注射麻醉，背位固定，做頸部正中縱切口（長2cm），分離氣管、左側頸總動脈及右側頸淺靜脈。插入氣管插管固定，然后將其的一端與壓力換能器相連并連接在微機記錄系統(tǒng)，描記呼吸曲線。結扎頸淺靜脈遠心端，在近心端插入靜脈插管（內充 0.1%的肝素化生理鹽水）結扎固定，注入0.5%肝素（0.01 mL·kg-1）抗凝。結扎頸總動脈遠心端，動脈夾夾閉近心端，插入充滿0.1%肝素的動脈插管結扎固定，將動脈插管經壓力換能器連于記錄儀或微機系統(tǒng)上，記錄一段正常血壓曲線。經頸淺靜脈推注0.01%的腎上腺素（0.1 mL·100 g-1），觀察動物的表現(xiàn)及存活時間。動物死亡或處死后，同上取出肺臟，稱重并計算肺質量系數(shù)。

4、大鼠油酸靜脈注射致肺水腫模型

將試驗動物大鼠隨機分成2組，A組8只，B組12只。A組為正常對照組，不作任何處理；B組（試驗組）為油酸致傷組，稱質量，并沿大鼠尾靜脈注射油酸0.2 mL·kg-1，推注后觀察大鼠呼吸頻率、濕啰音、咳血、身體抽搐等體征變化出現(xiàn)的時間，并與A組進行比較。1.5h后處死，A 組動物也在同一時間處死。解剖時，先結扎氣管以免液體外溢，然后將肺和心臟一起取出，剪除心臟和脂肪組織，并用濾紙吸去肺表面的液體，最后用天平分別稱量 A、B組大鼠的肺質量，計算肺質量系數(shù)，若肺質量系數(shù)>1%，證明肺水腫形成。

5、大鼠氯仿靜脈注射致肺水腫模型

有研究者采用大鼠，稱重，實驗組大鼠腹腔注射25%氯仿12mL·kg-1，然后觀察一般情況和呼吸，存活時間。對照組不作任何處理，對動物實行安樂死。解剖，先結扎氣管以免液體外溢，將肺和心臟一起取出，剪除心臟和其它脂肪組織，用濾紙吸去肺表面的液體，用天平稱兩肺質量，計算肺質量系數(shù)，若肺質量系數(shù) >1%，證明肺水腫已形成。

三、家兔

1、家兔快速輸液致肺水腫模型

稱重家兔2%普魯卡因局部麻醉，將動物仰臥固定于實驗臺上，分離一側頸總動脈以備取血，用BL-410生物機能實驗系統(tǒng)記錄心率及呼吸頻率。注入生理鹽水（10 mL·kg-1），迷走神經組切斷家兔頸部兩側迷走神經。各組動物以出現(xiàn)進行性呼吸困難、發(fā)紺、鼻溢出粉紅色泡沫樣痰，可聞及濕性啰音并逐漸增強為建模成功。

2、腎上腺素靜脈輸注致肺水腫模型

沿家兔耳緣靜脈注入1∶5000腎上腺素 0.4~0.6 mg·kg-1；或在快速輸入大量生理鹽水后，將0.1%腎上腺素 0.5 mg·kg-1用生理鹽水稀釋10倍后加入輸液瓶中，繼續(xù)滴注，可造成肺水腫。腎上腺素復制肺水腫模型簡單、易操作、臨床癥狀典型，經濟易行且重復性好，有關檢測指標的變化充分體現(xiàn)了該型肺水腫的許多臨床特點。在注入后5min可聽及濕啰音，30min后即出現(xiàn)粉紅色樣痰，所測得的肺系數(shù)大于正常值約３倍左右。

3、家兔油酸靜脈注射致肺水腫模型

稱重，用25%烏拉坦100mg·kg-1耳緣靜脈注射麻醉家兔，固定手術臺上。剪去頸部被毛，分離氣管，行氣管插管術。沿家兔耳緣靜脈注入油酸 0.08 mL·kg-1，對照組不作任何處理。觀察家兔的呼吸及一般情況改變，通過計算機生物信號分析記錄系統(tǒng)描記呼吸曲線。若呼吸曲線明顯變淺變快或氣管內涌出粉紅色泡沫樣液體，則提示肺水腫已形成，記錄肺水腫形成的時間。如有家兔死亡，記錄死亡時間。放血處死家兔，取氣管—支氣管—肺。用粗線自氣管下方結扎氣管，自上而下打開胸腔，將肺和心臟一起取出，剪去心臟，用濾紙吸去肺表現(xiàn)的水分，天平稱兩肺質量，計算肺質量系數(shù)，若肺質量系數(shù)>5.0，證明肺水腫已形成。

4、家兔氯仿靜脈注射致肺水腫模型

有研究者采用家兔，稱重，用25%烏拉坦100mg·kg-1耳緣靜脈注射麻醉家兔，固定手術臺上。剪去頸部被毛，分離氣管，行氣管插管術。沿家兔耳緣靜脈注入10%氯仿（0.1 mL·kg-1），對照組不作任何處理。觀察家兔的呼吸及一般情況改變，通過計算機生物信號分析記錄系統(tǒng)描記呼吸曲線。若呼吸曲線明顯變淺變快或氣管內涌出粉紅色泡沫樣液體，則提示肺水腫已形成，記錄肺水腫形成的時間。如有家兔死亡，記錄死亡時間。放血處死家兔，取氣管—支氣管—肺。用粗線自氣管下方結扎氣管，自上而下打開胸腔，將肺和心臟一起取出，剪去心臟，用濾紙吸去肺表面的水分，天平稱兩肺質量，計算肺質量系數(shù)，若肺質量系數(shù)>5.0，證明肺水腫已形成。

四、小型豬

1、小型豬油酸靜脈注射致肺水腫模型

將實驗動物隨機分成2組。A組為正常對照組，B組為油酸致傷組，每組10只。兩組動物在實驗前均禁食12h。將動物用3%的戊巴比妥鈉5mL和速眠新1mL肌注麻醉后，俯臥位固定于手術臺。3%的戊巴比妥鈉5mL·h-1維持麻醉。A組（對照組）不作任何處理，B組沿小型豬耳緣靜脈緩慢注入油酸0.15 mL·kg-1，30 min內注完。觀察兩組動物的呼吸及一般情況改變。B組動物均以油酸推注4h后放血處死，A組動物在同一時間放血處死，打開胸腔，分離出氣管，于環(huán)狀軟骨下結扎，在結扎處以上切斷氣管。B組動物用線在氣管分叉處結扎以防止肺水腫液滲出，將氣管連同整個肺臟取出，小心剔除肺外組織。

總結

動物實驗是生命科學研究及其他一些自然科學研究的重要手段，動物肺水腫模型可以更好的研究人類發(fā)病原因、發(fā)病機理，對于臨床治療和藥物試驗有重要的推動作用。目前國內外制備實驗性肺水腫動物模型方法很多，但是應用不同方法和不同動物導致的肺水腫結果都需要研究。通過肺水腫動物實驗，為肺水腫防治研究提供模型依據。