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呼吸系統(tǒng)類動物模型

煙熏法慢性支氣管炎動物模型

對于由吸煙引的呼吸道損傷,臨床上還沒有有效的防治方法,探索有關(guān)吸煙導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)損害的發(fā)病機(jī)制,進(jìn)行防治方法的評價和新藥的研發(fā),很大程度上需要通過動物模型進(jìn)行。

利用熏煙所致的慢性支氣管炎模型,與人類發(fā)病過程有很大的相似性,為早期適時對煙霧引起的呼吸道損傷采用干預(yù)和治療提供幫助。

原理

煙熏法構(gòu)建慢性支氣管炎動物模型的基本原理是吸煙所致煙霧對呼吸道的長期刺激是慢性支氣管炎最重要的病因,紙煙所含的焦油和煙堿可增加副交感神經(jīng)興奮性,使支氣管收縮痙攣,增加氣道阻力;同時,支氣管黏膜腺體增生與肥大,杯狀細(xì)胞增生與鱗狀上皮細(xì)胞化生,黏膜分泌增多與積聚,上皮細(xì)胞纖毛運(yùn)動受抑制;黏膜充血、水腫,肺泡吞噬細(xì)胞功能降低,使氣道凈化能力減弱,均易引起感染。吸煙時間愈長,煙量愈大,患病率也愈高。

材料與儀器

器材:


① 50 mL 注射器;


② 香煙;


③ 1000 mL 下口瓶;


④ 大鼠/小鼠。

步驟

煙熏法慢性支氣管炎動物模型的基本過程可分為如下幾步:
(一)大鼠
A. 煙熏 25 支紙煙、4 h/d、持續(xù) 2~6 周復(fù)制成亞急性慢性支氣管炎模型,最初引起基底細(xì)胞增生,隨后表層上皮漿液細(xì)胞化生及新形成的黏液細(xì)胞增生和由于細(xì)胞肥大使上皮增厚。并有喉和近端氣道黏膜下腺肥大與氣管黏液量增加,近端和末梢氣道上皮及肺泡上皮增殖。
煙熏停止后,氣管、近端氣道和遠(yuǎn)端細(xì)支氣管分泌細(xì)胞數(shù)量可逐漸恢復(fù)到對照水平。
(二)小鼠
A. 將小鼠至于 1000 ml 下口瓶中,瓶蓋留有直徑 1.5 cm 通氣孔,下口連接一個三通管,另兩端分別連接 50 mL 注射器及點(diǎn)燃的香煙,用注射器通過三通管連續(xù)吸注香煙煙霧,每次 400 mL(瓶中煙霧濃度約為 4%)煙熏 30 分鐘。
B. 前 10 天上、下午各煙熏 1 次,后 10 天每天下午煙熏 1 次,連續(xù) 30 次,全程 20 天。