動物實驗
急性胰腺炎模型
胰腺炎動物模型的制備方法主要有以下幾種:
1.?;悄懰徕c造模
1)模型建立方法:大鼠于術前12h禁食,自由飲水,戊巴比妥溶液2mg/100g體質量行腹腔內麻醉,固定。經上腹正中切口入腹,提起十二指腸以小號血管夾分別夾住十二指腸段和肝門部胰膽管。TB針(4.5針頭,1ml注射器)穿刺胰膽管(最好用微泵注射),注射5%C?;悄懰徕c(0.1ml/100g),持續(xù)1min,停留5min,然后拔除針頭,去除血管夾。可觀察大鼠胰腺組織明顯水腫、出血,縫合腹壁各層。
2)模型的特點和功用:此法是急性壞死性胰腺炎(ANP)較成熟的模型。
3)模型建立和使用注意事項:24h的存活率為50%左右
2.蛙皮素造模
1)模型建立方法:大鼠于術前12h禁食,自由飲水,蛙皮素(25μg/kg)腹腔注射,注射后5h形成水腫性急性胰腺炎(CIP)
2)模型的特點和功用:此法是水腫性急性胰腺炎模型,程度較輕.
3)模型建立和使用注意事項:現(xiàn)在國內以研究ANP為主,使用此模型請注意研究內容.
3.逆行膽管注射法
結扎胰膽管,行主胰管套管插管,經主胰管注入可激活胰酶的物質或胰酶,如脫氧膽酸鈉、自體膽汁等。胰酶注入胰管產生急性胰腺炎,如與PGE2同時灌注則產生急性壞死性胰腺炎。Schmidt等用低量胰管灌注糖脫氧膽酸結合靜脈注射蛙皮素制成大鼠急性胰腺炎模型,可產生腺胞中度壞死的均勻損傷,適用于對胰腺炎的研究.
4.胰管膽結扎法
結扎進入十二指腸處胰膽管或單純結扎胰管,Lerch等在壺腹部結扎胰膽管,結扎后6h出現(xiàn)水腫性胰腺炎,12h后出現(xiàn)出血、壞死、炎性細胞浸潤。該模型的優(yōu)點是簡單且避免了藥物引起非特異性系統(tǒng)影響,與人體膽汁返流性胰腺炎相類似,但有時只產生輕度胰腺炎。Runzi等對此方法進行了改進,把十二指腸的近端10cm離斷后兩端閉合結扎膽總管,胃與十二指腸吻合,使胰液流入閉袢,隨其內壓增加而發(fā)生逆流,形成急性壞死性胰腺炎,術后4h發(fā)生水腫性胰腺炎,9~12h有出血壞死。另外,還有用胰管結扎加胰動脈或靜脈阻斷產生急性胰腺炎.
5.飼養(yǎng)法
用無膽堿乙硫氨酸飼養(yǎng)雌性大鼠制成急性胰腺炎模型,而雄性大鼠對藥物刺激不敏感。用無膽堿乙硫氨酸飼養(yǎng)幼鼠,4d后均發(fā)生了胰腺壞死及腹腔脂肪壞死。原理可能是無膽堿乙硫氨酸致胰腺腺泡分泌作用受阻,酶原顆粒和溶酶體在細胞內激活.
6.促分泌法
用蛙皮素類似物CCK-PZ靜脈或皮下注射,使胰腺蛋白水解酶分泌大量增加達到能引起胰腺腺泡自溶的水平.
7.離體胰腺炎模型
主要采用孤立體外灌注技術,游離胰腺及十二指腸,行脾動脈、腸系膜動脈、門靜脈和胰管插管;然后取下胰腺,連接能控制溫濕度的氧和灌注循環(huán)器;穩(wěn)定灌注30min后,從動脈灌注游離脂肪酸模擬酒精性胰腺炎;阻塞胰管并靜脈注射蛙皮素產生膽源性胰腺炎;使缺血2 h產生缺血性胰腺炎.